LABORATOIRE DE BIOLOGIE DE LA NUTRITION

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NOTRE SAVOIR-FAIRE :
Muscles isolés incubés

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Les muscles sont incubés selon une adaptation de la méthode validée par le groupe de Goldberg, largement décrite dans la littérature (Minet Quinard R AJP 2004). L’epitrochlearis est utilisé car il est le plus adapté à ce type d’étude. Après dissection, les epitrochlearis sont incubés dans 3 mL de tampon Krebs-Ringer (119 mM NaCl, 4,8 mM KCl, 1,25 mM MgSO4, 25 mM NaHCO3, 1,24 mM NaHPO4, 1,0 mM CaCl2, 2 mM HEPES, pH 7,4), contenant également du glucose (8 mM), de l’insuline (0,01 U/ml), et d'albumine bovine (BSA) (0,1% w/v). Les muscles sont pré-incubés pendant 30 minutes à 37°C sous 95%O2:5%CO2. Les muscles sont ensuite transférés dans un tube contenant 3 mL de milieu d’incubation pendant 2 heures. Au terme de l’incubation, les muscles et les milieux d’incubation sont recueillis et conservés à -80°C.